猪杀菌/通透性增加蛋白基因siRNA载体构建及干扰效果评价

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qingsong009

【摘要】

：

本研究旨在构建并筛选猪(Sus scrofa)BPI基因的高效siRNA干扰载体,为在细胞水平上研究猪BPI基因的功能和作用机制提供基础。参照猪BPI基因(GenBank登录号:EF436278)全长编码

【作者】

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吴正常殷学梅夏日炜孙寿永朱国强吴圣龙包文斌

【机构】

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扬州大学动物科学与技术学院,扬州大学兽医学院

【出处】

：

畜牧兽医学报

【发表日期】

：

2015年3期

【关键词】

：

猪 BPI基因 siRNA载体 RNA干扰 porcine BPI gene siRNA vector RNA interference

【基金项目】

：

国家自然科学基金(31172183,31140027),转基因生物新品种培育科技重大专项(2014ZX08006-001B),江苏省科技支撑计划(BE2012330,BE2013345,BE2014357),江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)

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本研究旨在构建并筛选猪(Sus scrofa)BPI基因的高效siRNA干扰载体,为在细胞水平上研究猪BPI基因的功能和作用机制提供基础。参照猪BPI基因(GenBank登录号:EF436278)全长编码区序列,设计其特异性发夹siRNA干扰片段,并将其克隆插入pcDNA 6.2-GW/EmGFPmiR干扰载体中,构建猪BPI基因4个干扰siRNA表达载体RB1、RB2、RB3和RB4,1个阴性对照NC,并通过PCR和测序进行验证,构建成功后转染猪小肠上皮细胞IPEC-J2并检测其干扰效率。结果发现,所构

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