Taqman定量PCR技术检测转基因大豆中外源基因拷贝数

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[目的]采用Taqman定量PCR技术检测转基因杂交大豆中外源nos终止子基因的拷贝数.[方法]以大豆凝集素基因为内参照基因,以非转基因大豆基因组DNA为内参照基因标准品,通过梯度稀释法分别求取了内参照基因和质粒DNA的Ct值与拷贝数对数值的相关性标准曲线方程,并通过将得到的Ct值代入标准曲线方程求取了样品的拷贝数.[结果]内参照基因标准曲线方程为y=-3.422x+35.201,R(2)=0.998;外源基因标准曲线方程为y=-3.348x+34.890,R(2)=0.999.nos终止子基因及其下游边界序列在转基因杂交大豆中为单拷贝.[结论]该研究为确定转基因大豆外源基因拷贝数提供厂理论依据.
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