【摘 要】
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目的构建急性肺损伤体外细胞模型。方法以TNF-α10ng/mL刺激肺泡Ⅱ型上皮A549细胞,采用酶联免疫吸附法检测细胞上清液中IL-4、IL-1β浓度,比色法检测丙二醛浓度、总超氧化物歧化
【机 构】
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福建医科大学附属第二医院呼吸与危重症医学科福建省呼吸医学中心,广州军区广州总医院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81541002);福建省自然科学基金计划项目(2015J0102);福建省卫生厅青年科研课题资助项目(2013-2-51);福建省中青年教师教育科研项目(JB13085);福建省泉州市科技项目(Z[2013]0206)
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目的构建急性肺损伤体外细胞模型。方法以TNF-α10ng/mL刺激肺泡Ⅱ型上皮A549细胞,采用酶联免疫吸附法检测细胞上清液中IL-4、IL-1β浓度,比色法检测丙二醛浓度、总超氧化物歧化酶活力,RT—PCR及免疫印迹法分别检测NF—κBmRNA及蛋白的表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果以TNF-α刺激A549细胞,细胞上清液IL-1β、IL-4浓度上升;细胞内丙二醛增多,超氧化物歧化酶活力下降;NF—κB在基因及蛋白水平表达上调(P〈0.05)。结论以TNF-α刺激肺泡Ⅱ型上皮A549细胞可诱导炎
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