【摘 要】
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利用带有氯霉素乙酰转移酶报道基因的检测载体 ,从痘苗病毒基因组DNA中筛选到一个增强子样片段VV16。序列分析表明 ,该片段长 112bp ,是痘苗病毒DNA依赖性RNA聚合酶、polyA聚
【机 构】
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中国预防医科院病毒基因工程国家重点实验室!北京100052; 中国预防医科院病毒基因工程国家重点实验室!北京10;
【基金项目】
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国家科委“863”高科技资助项目!( 863 10 2 11)
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利用带有氯霉素乙酰转移酶报道基因的检测载体 ,从痘苗病毒基因组DNA中筛选到一个增强子样片段VV16。序列分析表明 ,该片段长 112bp ,是痘苗病毒DNA依赖性RNA聚合酶、polyA聚合酶亚单位和DNA聚合酶基因RPO30的一部分 ,含有 4个AT丰富区。采用带有β 半乳糖苷酶报道基因的载体检测发现 ,该片段正向可以增强报道基因表达 9 0倍 ,反向可以增强报道基因表达 4 1倍。RNADotblotting实验证实 ,它对基因的增强活性表现在转录水平上。DNA删切实验证实 ,5′端 10bp及 3′端 12bp对其活性有重要调节作用 ,而该片段nt76～ 82的序列对增强子的活性至关重要。
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