miR-186过表达慢病毒载体的构建及鉴定

来源 :吉林大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：abc0454

【摘要】

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目的:构建miR-186过表达慢病毒载体并包装慢病毒,探讨miR-186在人胚胎肾细胞(HEK)293T细胞系中的感染效率和表达水平。方法:以Hsa-miR-186前体序列为模板,设计并合成引物,PCR

【作者】

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李胜男王梦旭胡伟东陈少凤陈杏兰李友

【机构】

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广东省衰老相关心脑疾病重点实验室,广东医科大学附属医院神经病学研究所

【出处】

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吉林大学学报:医学版

【发表日期】

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2019年5期

【关键词】

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miR-186 慢病毒 HEK293T细胞过表达慢病毒载体绿色荧光蛋白 miR-186lentivirusHEK293T cellsoverexpressi

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助课题(81571157).

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目的:构建miR-186过表达慢病毒载体并包装慢病毒,探讨miR-186在人胚胎肾细胞(HEK)293T细胞系中的感染效率和表达水平。方法:以Hsa-miR-186前体序列为模板,设计并合成引物,PCR法扩增pre-miR-186基因序列,并将其克隆到携带EGFP/Puromycin的慢病毒载体FV040中,经EcoRⅠ和AgeⅠ酶切及测序鉴定后获得重组慢病毒载体。利用Lipofectamine2000将重组慢病毒质粒FV040Vector和FV040miR-186分别与辅助质粒通过共转染至HEK293T

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