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目的
采用过度表达APPsw基因的SH-SY5Y细胞(APPsw细胞),体外观察不同浓度的胰岛素对APPsw细胞内tau蛋白磷酸化的影响。
方法应用Western blot技术检测APPsw细胞内tau蛋白磷酸化的表达;应用免疫荧光双标与共聚焦激光扫描显微镜检测APPsw细胞内p-GSK-3β和p-tau的共表达。
结果Western blot结果显示,与对照组相比,1 000 nM的胰岛素使APPsw细胞内Thr231和Ser396位点上的tau蛋白磷酸化表达水平分别降低到(68.91±13.55)和(45.53±22.16)(P<0.05);共聚焦显微镜检测结果显示p-tau和p-GSK-3β主要分布于细胞质中,而且在APPsw细胞中二者的表达有一定关系。
结论胰岛素抑制APPsw细胞内tau蛋白的过度磷酸化,其机制可能与GSK-3β蛋白活性减小有关。