【摘 要】
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试验旨在建立新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)σC蛋白的原核表达系统,制备σC蛋白的多克隆抗体,并评估所制备抗体的效价。通过RT-PCR方法扩增获得NDRV DH13株σC基因,连接至pET-30a(+
【机 构】
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佛山科学技术学院生命科学与工程学院
【基金项目】
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广东省基础与应用基础研究区域联合基金-青年基金项目(2019A1515110157),广东省教育厅青年创新人才项目(2018KQNCX277),佛山科学技术学院动物新发疫病防控重点实验室“开放基金”项目(KLPREAD201801-09、KLPREAD201801-08),广东省现代农业产业技术体系创新团队(2019KJ137)
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试验旨在建立新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)σC蛋白的原核表达系统,制备σC蛋白的多克隆抗体,并评估所制备抗体的效价。通过RT-PCR方法扩增获得NDRV DH13株σC基因,连接至pET-30a(+)及pET-32a(+)载体中,构建原核表达质粒,并将其转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导获得两种σC重组蛋白,经SDS-PAGE分析蛋白表达形式。利用切胶方法纯化不含His标签σC重组蛋白,利用Ni-NTA柱纯化含His标签σC重组蛋白。以纯化的无His标签蛋白为免疫原免疫兔子获得兔抗σC
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