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目的 检测人前列腺癌细胞(PC-3M)中Omi/HtrA2的表达情况,并构建其小干扰RNA(siRNA)表达载体,探讨Omi/HtrA2对PC-3M凋亡的影响.方法以细胞免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Omi/HtrA2在前列腺癌细胞系(PC-3M)和正常前列腺细胞中的表达.利用软件辅助设计Omi/HtrA2特异性siRNA序列,体外合成后将其克隆入真核表达载体psiRNA-hH1neo.以脂质体法转染psiRNA-Omi/HtrA2载体至PC-3M中,以RT-PCR和Western blot法检测psiRNA-Omi/HtrA2对Omi/HtrA2转录和表达的沉默效应.用噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞法检测siRNA导致Omi/HtrA2基因沉默后,PC-3M细胞凋亡的变化.结果细胞免疫组织化学和RT-PCR均显示Omi/HtrA2在PC-3M细胞中高表达.酶切和DNA测序证实合成的siR-NA基因序列正确,并已被准确克隆入psiRNA-hH1neo载体中.psiRNA-Omi/HtrA2载体可特异性抑制PC-3M细胞中Omi/HtrA2的表达.转染psiRNA-Omi/HtrA2载体的PC-3M细胞凋亡下调.结论促凋亡因子Omi/HtrA2可导致前列腺癌细胞凋亡,Omi/HtrA2的表达对前列腺癌的发展有重要作用.