利用中间偃麦草抗病基因同源序列分离黄矮病抗性候选基因克隆

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根据已克隆植物抗病(R)基因编码蛋白质的保守结构设计简并引物,利用同源序列法PCR扩增、克隆到9个具有开放阅读框的中间偃麦草R基因同源片段(Resistance Gene Analogs,RGAs)。利用抗黄矮病材料(含Bdv2)、感黄矮病材料(无Bdv2)进行RFLP分析,筛选到1个NBS类RGA序列TirgaZl与Bdv2连锁。根据TirgaZl的序列重新设计l对引物,优化PCR扩增条件,将其转化为经典特异PCR标记(SC-TZl)。利用该特异PCR标记(SC-TZI)和克隆池.PCR法筛选抗黄矮病小
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