脱毛碱性蛋白酶定点突变的初步分析

来源 :四川大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tanyanlong

【摘要】

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来自于Bacillus pumilus菌株BA06的碱性蛋白酶DHAP具有良好的脱毛能力．为了更好地了解DHAP的催化特性和进一步改造使之更加符合制革工艺的要求，根据蛋白质同源建模和嗜冷嗜热酶

【作者】

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杨庆军张小伟冯红张义正

【机构】

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四川大学生命科学学院四川省分子生物学与生物技术重点实验室

【出处】

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四川大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2010年4期

【关键词】

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脱毛蛋白酶温度适应性定点突变枯草芽孢杆菌 dehairing protease temperature adaptation site-directe

【基金项目】

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国家863专题项目（2006AA02Z221）

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来自于Bacillus pumilus菌株BA06的碱性蛋白酶DHAP具有良好的脱毛能力．为了更好地了解DHAP的催化特性和进一步改造使之更加符合制革工艺的要求，根据蛋白质同源建模和嗜冷嗜热酶氨基酸组成的统计分析结果，确定了13个氨基酸位点进行定点突变．通过牛奶平板和对粗酶液在不同温度和热稳定性方面的活性进行了分析．结果发现位于DHAP空间结构上底物结合“口袋”开口处α-螺旋上的氨基酸残基（E220，V223和K244）严重影响酶的活性；位于底物结合口袋袋底的三个保守位点V256L、V257I和V258I

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