【摘 要】
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应用RT-PCR方法扩增七带石斑鱼类胰岛素生长因子-Ⅰ（esIGF-Ⅰ）成熟肽序列。该成熟肽序列由210个碱基组成,编码70个氨基酸,包括B-C-A-D 4个结构域。将此成熟肽片段导入原核表达
【机 构】
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中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,上海海洋大学水产与生命学院,中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛市海水鱼类种子工程与生物技术重点实验室
【基金项目】
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国家“八六三”高技术研究发展计划（2012AA10A413）,鲆鲽类现代产业技术体系（CARS-50）,中央级公益性事业单位基本科研业务费项目（20603022012022号）,山东省自然科学基金项目（ZR2012CQ025）,青岛市科技计划项目（11-1-1-11-hy）
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应用RT-PCR方法扩增七带石斑鱼类胰岛素生长因子-Ⅰ（esIGF-Ⅰ）成熟肽序列。该成熟肽序列由210个碱基组成,编码70个氨基酸,包括B-C-A-D 4个结构域。将此成熟肽片段导入原核表达载体pET-28a上,在IPTG诱导下成功在E.coli BL21（DE3）中融合表达。SDS-PAGE分析表明,融合蛋白大小为11 ku,在IPTG诱导后3 h表达量最高,占菌体总蛋白的51.8%,重组蛋白主要以包涵体形式存在。对重组蛋白进行变性、纯化和复性,获得了纯化的重组蛋白。Western-blotting免
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