重组质粒p-Egr-p16的构建及在SMMC-7721细胞中的辐射诱导表达

来源 :中华放射医学与防护杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wennny77
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目的构建重组质粒p-Egr-p16并探讨在SMMC-7721细胞中的辐射诱导表达及抗肝癌的作用.方法用双酶切、粘端连接的方法构建了含有辐射诱导特性的早期反应因子Egr-1和p16的p-Egr-p16的质粒载体,以脂质体介导的方法,将重组载体导入人肝癌SMMC-7721细胞,采用RT-PCR的方法检测了不同剂量60Co γ射线照射转染后的人肝癌细胞p16基因转录水平的变化和2 Gy照射后不同时间的p16基因转录水平的变化.结果经研究证实,1~6 Gy照射后p16的转录水平高于对照,在2~4 Gy照射后达到峰值,2 Gy照射后不同时间均有所增高,在照射后24 h增高最明显.结论2 Gy60Coγ射线照射后p16基因转录水平在2~24 h呈现时间依赖性的增高,在24 h增高最明显,48和72 h逐渐降低,但仍高于对照组.提示60C0 γ射线可激活早期反应生长因子Egr-1,从而介导其下游基因p16的表达增强.

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