CYP3A4高表达肝细胞株建立及其对三氯乙烯毒性的影响

来源 :中国药理学与毒理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kusotang
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目的建立CYP3A4高表达肝细胞株并观察其对三氯乙烯毒性的影响。方法PCR扩增CYP3A4基因并将其克隆到慢病毒高表达载体中,将已经构建的慢病毒载体进行转染后,收集病毒上清,感染正常L02肝细胞。用嘌罗霉素进行筛选得到CYP3A4高表达肝细胞株,通过荧光定量PCR和Western蛋白质印迹法鉴定细胞株。用三氯乙烯0,0.25,0.5,1.0,2.0和4.0mmol·L^-1对正常肝肝细胞和CYP3A4高表达肝细胞进行染毒12h,实时定量PCR检测凋亡基因bcl-2,胱天蛋白酶3,胱天蛋白酶8和胱
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