【摘 要】
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目的建立并评估一种快速鉴定分枝杆菌的多重PCR法，为结核病的快速病原诊断提供技术手段。方法选取16S rRNA、Rv0577、RD9和mtbk_20680基因，设计特异性引物，经条件优化，建立多重PCR方法。对非洲分枝杆菌、牛分枝杆菌、卡介苗(BCG)菌株、7种常见的非结核分枝杆菌(NTM)、7种常见的呼吸道病原菌和甘肃省93株结核分枝杆菌(MTB)临床分离株进行检测鉴定，评价其敏感性和特异性。结
【机 构】
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温州医科大学检验医学院，生命科学学院 325035,中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室，北京 102206,中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 传染病预防控制国家重点
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目的建立并评估一种快速鉴定分枝杆菌的多重PCR法，为结核病的快速病原诊断提供技术手段。
方法选取16S rRNA、Rv0577、RD9和mtbk_20680基因，设计特异性引物，经条件优化，建立多重PCR方法。对非洲分枝杆菌、牛分枝杆菌、卡介苗(BCG)菌株、7种常见的非结核分枝杆菌(NTM)、7种常见的呼吸道病原菌和甘肃省93株结核分枝杆菌(MTB)临床分离株进行检测鉴定，评价其敏感性和特异性。
结果16S rRNA、Rv0577、RD9和mtbk_20680基因产物长度分别为543 bp、786 bp、369 bp和231 bp。MTB北京基因型的4个基因均为阳性，而非北京基因型mtbk_20680基因为阴性；非洲分枝杆菌、牛分枝杆菌、BCG菌株均为16S rRNA和Rv0577阳性；7种NTM仅16S rRNA为阳性；7种呼吸道菌检测结果均为阴性。93株MTB临床分离株中鉴定为北京基因型菌株的有80株，占86.02%，非北京型菌株有13株，占13.98%。该方法的特异性为100%。
结论该多重PCR法可以准确鉴别分枝杆菌、结核分枝杆菌复合群(MTBC)、NTM、MTB、北京基因型与非北京基因型MTB，具有高度的敏感性和特异性。
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