【摘 要】
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为了研究Zfx基因在精子发生过程中的作用,本实验利用RNA干扰技术针对猪Zfx基因mRNA的不同靶位设计构建了4个不同的shRNA干扰载体:3个RNAi-Ready-pSIREN-RetroQ-ZsGreen(pSIRE
【机 构】
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新疆兵团第九师165团兽医站,额敏县,834609石河子大学动物科技学院,石河子,832003;新疆军区农业新技术实验培训基地,石河子,830000;
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为了研究Zfx基因在精子发生过程中的作用,本实验利用RNA干扰技术针对猪Zfx基因mRNA的不同靶位设计构建了4个不同的shRNA干扰载体:3个RNAi-Ready-pSIREN-RetroQ-ZsGreen(pSIREN)质粒重组载体(a、b、c),1个pLL3.7慢病毒骨架质粒重组载体(pLL3.7-shRNA).通过对仔猪睾丸体外培养生精细胞中的Zfx基因进行人为干扰后,提取总mRNA,利用qRT-PCR对Zfx基因mRNA表达进行丰度测定.结果表明:pSIREN质粒重组载体干扰组对Zfx基因没有明显地作用,慢病毒骨架质粒重组载体干扰组对Zfx基因表达抑制效果显著,抑制率为51％(P＜0.05).结论:筛选获得了慢病毒骨架质粒重组干扰载体,其对仔猪睾丸体外培养生精细胞中的Zfx基因表达具有显著地干扰作用.
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