探讨下调miR-488靶向Jag1对缺氧复氧心肌H9c2细胞损伤的影响。
方法构建缺氧复氧心肌H9c2细胞损伤模型，转染miR-488 inhibitor。分别用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞的增殖的凋亡，分别用试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(malonaldehyde，MDA)和过氧化氢酶(catalase，CAT)的水平，用Western印迹检测Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein，Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2，Bcl-2)蛋白表达的差异。预测miR-488的靶基因，并用荧光素酶报告系统鉴定二者的靶向关系。在心肌H9c2细胞中共转染miR-488 inhibitor、Jag1 siRNA，给予缺氧复氧处理，检测细胞增殖、凋亡和LDH、SOD、MDA、CAT水平以及Bax、Bcl-2蛋白表达。
结果缺氧复氧心肌H9c2细胞中miR-488表达升高，细胞增殖活性降低，凋亡增多，Bax蛋白表达升高，Bcl-2表达降低，MDA水平升高，CAT、SOD水平降低，细胞培养液上清中LDH升高。转染miR-488 inhibitor使经缺氧复氧处理的心肌H9c2细胞中miR-488表达降低，细胞增殖活性升高，凋亡减少，Bax蛋白表达降低，Bcl-2蛋白表达升高，MDA水平降低，CAT、SOD水平升高，培养液上清中LDH水平降低。下调miR-488靶向负调控Jag1表达。Jag1 siRNA可逆转miR-488 inhibitor对缺氧复氧心肌H9c2细胞增殖、凋亡和LDH、SOD、MDA、CAT水平以及Bax、Bcl-2蛋白表达作用。
结论下调miR-488靶向Jag1可减轻缺氧复氧心肌H9c2细胞的损伤。