【摘 要】
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目的 观察补肾活血方对卵巢功能早衰模型大鼠卵巢组织中外泌体相关膜蛋白表达情况及卵巢组织形态和功能的影响。方法 选取30只大鼠，腹腔注射顺铂建立卵巢功能早衰模型，造模成功后随机分为模型组、阳性对照组和中药低、中、高剂量组，每组6只。另取6只大鼠，为空白组。空白组和模型组大鼠每日灌胃蒸馏水；中药低、中、高剂量组分别按每天9.72、19.44、38.88 g/kg剂量补肾活血方灌胃；阳性对照组大鼠按每天
【基金项目】
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湖南省教育厅科学研究项目（21A0233，18C0388）； 湖南省中医药科研计划重点项目（2021025）； 国家级大学生创新项目（202110541042）； 湖南省大学生研究性学习与创新性实验项目（2021-2394）； 湖南中医药大学中西结
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目的 观察补肾活血方对卵巢功能早衰模型大鼠卵巢组织中外泌体相关膜蛋白表达情况及卵巢组织形态和功能的影响。方法 选取30只大鼠，腹腔注射顺铂建立卵巢功能早衰模型，造模成功后随机分为模型组、阳性对照组和中药低、中、高剂量组，每组6只。另取6只大鼠，为空白组。空白组和模型组大鼠每日灌胃蒸馏水；中药低、中、高剂量组分别按每天9.72、19.44、38.88 g/kg剂量补肾活血方灌胃；阳性对照组大鼠按每天0.09 mg/kg剂量灌胃给药戊酸雌二醇片，连续21 d。每周称量体质量，计算体质量增量，每天观察大鼠动情周期。末次给药后于第2天取血和卵巢、胸腺、脾脏，称量脏器重量，计算脏器指数；ELISA检测大鼠血清中雌二醇(estradiol 2，E2)和抗缪勒管激素（anti-mullerian hormone，AMH）激素水平变化含量；HE染色观察卵巢形态变化；免疫组织化学法检测卵巢组织中外泌体膜蛋白CD63、CD81、CD82的表达水平；透射电镜观察大鼠外周血外泌体形态；Western blot检测大鼠外周血外泌体相关蛋白。结果 与空白组相比，模型组动情周期紊乱、AMH和E2减少（P<0.05，P<0.01），体质量和体质量增量明显减少（P<0.01），卵巢指数、胸腺指数明显减少而脾脏指数明显升高（P<0.01），卵泡数和成熟卵泡明显减少，闭锁卵泡增多，卵巢组织CD63、CD81、CD82蛋白表达明显下降（P<0.01）。与模型组相比，中药中、高剂量组和阳性对照组AMH和E2显著升高（P<0.01），中药高剂量组和阳性对照组动情周期恢复正常，体质量及体质量增量明显升高（P<0.01），卵巢指数、胸腺指数明显升高而脾脏指数降低（P<0.05，P<0.01），给药组卵泡数依次增多，中药高剂量组和阳性对照组蛋白表达明显升高（P<0.01）。透射电镜和Western blot证明大鼠外周血外泌体提取成功。结论 补肾活血方可以明显改善卵巢功能早衰的情况，其改善卵巢形态和功能的机制可能与提高外周血和卵巢中外泌体活性有关。
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