【摘 要】
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目的探讨人泪腺上皮细胞原代体外培养、鉴定、冻存和复苏的方法.方法应用组织块培养法和混合消化液培养法对健康猝死成年人泪腺上皮细胞进行体外原代培养,应用免疫组织化学染
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目的探讨人泪腺上皮细胞原代体外培养、鉴定、冻存和复苏的方法.方法应用组织块培养法和混合消化液培养法对健康猝死成年人泪腺上皮细胞进行体外原代培养,应用免疫组织化学染色方法对培养有第2代上皮细胞进行Pan-keratin蛋白染色,以进行鉴定,取第2、4代细胞进行冻存,1个月后取出复苏.结果组织块培养法和混合消化液培养法均可获得较纯的泪腺上皮细胞,以组织块培养法接种的细胞早期生长较快,但第一代以后两种方法所获得的细胞生长无明显差别.两种方法所获取的泪腺上皮均为贴壁生长,未能形成生理状态下泪腺的囊腔结构,亦未见分泌小泡的形成.培养的泪腺上皮免疫组化染色Pan-keratin蛋白染色阳性.经冻存和复苏,细胞保持良好活性.结论组织块培养法和混合消化液培养法均可获得较纯的泪腺上皮细胞,但不能保持其泪腺束腔结构.
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