靶基因测序平台的构建

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目前,在后基因组时代各项研究计划和市场需求的双重推动下,DNA测序技术正在呈现加速发展的势头。毫无疑问,测序技术将被更广泛地应用于科学研究、药物开发和医疗诊断等多个领域,并将深刻地改变人们的生活。现实已经证明,很难用单一一种技术满足不同的应用需求。例如,在科学研究中对人类基因组进行大量的重复测序,超高通量的合成测序等深度测序平台是必不可少的。然而当只需要对少量的PCR产物或靶基因进行快速测序时,如仍然使用昂贵的大型平台将是一种极大的浪费,故使用Sanger测序方法仍不失为理想的选择。在医疗诊断领域,DNA测序一直以来被寄予厚望,人们希望其在疾病预防、诊断和个性化治疗等方面发挥巨大的作用。虽然人们梦想在不久的将来每个人的基因组都能被测定序列,但基于目前测序费用、伦理道德以及我国社会经济和医疗卫生的基本国情,在可预期的未来最为现实和有效的办法还是实现按需对病人进行特定基因即靶标DNA序列的测定,而只对少数特殊人群进行必需的全基因组测序。为此,有必要研发一种用于小规模靶标DNA测序的仪器,它应该具有体积小、样品消耗少、分析速度快、检测灵敏度高和完全自动化操作等特点,而且它对实验条件和操作人员水平不应有特殊要求,可以很方便地部署于各种场合,适应我国各地区医疗卫生发展不平衡的现状。针对这些需求,Sanger测序技术以其技术成熟、成本低和速度快等优势成为首选。因此,本课题的目标就是利用微流控技术研发基于Sanger测序的微型全分析系统。
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