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目的:建立同时测定鸡眼草中6种主要有效成分含量的分析方法,比较根、茎、叶不同部位中该6种成分含量高低.方法:采用超声提取法制备样品,以Agilent SB-AQ C18(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,0.1%甲酸溶液-0.1%甲酸甲醇溶液为流动相,流速为0.8 mL/min,梯度洗脱,采用260 nm与350 nm双波长检测,柱温为25℃.结果:异荭草素、异牡荆素、染料木苷、木犀草苷、染料木素、木犀草素分别在5~500、2~200、1~50、2~500、1~50、1~50μg/mL浓度范围内与峰面积积分线性关系良好,平均加样回收率为96.0%~99.6%,RSD均<2.0%.鸡眼草根、茎、全草中均含有该6种成分,但叶中未检测到染料木苷和染料木素.结论:该方法简便、准确,可用于鸡眼草中异荭草素、异牡荆素、染料木苷、木犀草苷、染料木素、木犀草素6种成分的同时测定,为鸡眼草的质量控制提供参考.检测6种成分在鸡眼草根、茎、叶、全草中含量差异较大,该结果可为鸡眼草的炮制及临床应用提供参考依据.