【摘 要】
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目的 分析体外培养细胞在H2O2染毒后8-oxo-dG的形成、细胞DNA 5-mC含量的变化规律,探讨其时间-剂量-效应关系和DNA氧化与DNA甲基化的关联性.方法 利用0、20、40、60、80和100 μmo]/L H2O2作用于人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549),每天染毒1次,每次2h,共持续4d,继续培养8d.应用高压液相色谱串联电化学检测技术分析细胞DNA 8-oxo-dG水平、高效毛细管电
【机 构】
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目的 分析体外培养细胞在H2O2染毒后8-oxo-dG的形成、细胞DNA 5-mC含量的变化规律,探讨其时间-剂量-效应关系和DNA氧化与DNA甲基化的关联性.方法 利用0、20、40、60、80和100 μmo]/L H2O2作用于人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549),每天染毒1次,每次2h,共持续4d,继续培养8d.应用高压液相色谱串联电化学检测技术分析细胞DNA 8-oxo-dG水平、高效毛细管电泳(high-performancecapillary electrophoresis,HPCE)法检测细胞全基因组DNA5-mC的含量.结果 DNA甲基化与DNA氧化呈现不同特点,A549细胞染毒80 μmol/L H2O2后DNA甲基化水平的改变需要10d以上的时间,而相同条件下DNA氧化水平的改变仅需12h,DNA甲基化的改变滞后于DNA氧化.H2O2可引起A549细胞甲基化程度降低,呈剂量依赖性关系.在一定的时间剂量范围内,DNA氧化与DNA甲基化作用间呈负相关关系(r=-0.72,P＜0.01).结论 DNA氧化能导致细胞DNA甲基化水平降低,DNA氧化可能是影响细胞甲基化的调控机制之一,在化学物质的毒作用效应中,DNA氧化可能是比DNA甲基化更早的一个重要分子事件。
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