菠菜43 kD叶绿素a结合蛋白编码基因克隆及原核表达条件优化

来源 :四川大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：aigufeixi

【摘要】

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将菠菜43 kD叶绿素结合蛋白编码基因亚克隆至原核表达载体pET-28a上,构建重组表达质粒pET-28a-psbC转化感受态E.coli BL21（DE3）,经IPTG诱导实现了外源基因的可溶性表达.探讨了

【作者】

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刘骥王豪肖清洁谢思思杜林方

【机构】

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四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,西南民族大学生命科学与技术学院

【出处】

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四川大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2015年1期

【关键词】

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43kD叶绿素a结合蛋白原核表达条件优化色素重组荧光性质 His-apo-CP43 fusion protein prokaryotic express

【基金项目】

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国家973计划项目（2009CB118502）,国家自然科学基金资助项目（30870181）,教育部博士点基金（NO.20070610168）资助,西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金资助（11NzYQN31）

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将菠菜43 kD叶绿素结合蛋白编码基因亚克隆至原核表达载体pET-28a上,构建重组表达质粒pET-28a-psbC转化感受态E.coli BL21（DE3）,经IPTG诱导实现了外源基因的可溶性表达.探讨了含组氨酸标签融合蛋白的最佳表达条件（包括表达单克隆、时间、温度对表达的影响）.利用Ni2＋-Sepharose 4 Fast Flow亲合层析纯化出His-apo CP43蛋白.体外重组实验证实 His-apo CP43能特异结合叶绿素a,经过温和电泳分离纯化所得体外重组色素蛋白复合物具有与提取自类囊

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