CARP基因重组腺病毒载体的构建

来源 :中国分子心脏病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hwqcy1021

【摘要】

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目的:利用Adeasy-1系统,构建并鉴定CARP基因重组腺病毒载体.方法:PCR扩增含有CARP全长cDNA的片段,经测序验证无误后,亚克隆至pAdTrack-CMV穿梭质粒,再与pAdEasy-1质粒在大肠

【作者】

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石毅刘宝华张震汪一波张禅那惠汝太

【机构】

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中国医学科学院协和医科大学阜外心血管病医院中德实验室

【出处】

：

中国分子心脏病学杂志

【发表日期】

：

2004年1期

【关键词】

：

CARP Adeasy系统 293细胞重组腺病毒 CARP Adeasy System 293 cells GFP

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目的:利用Adeasy-1系统,构建并鉴定CARP基因重组腺病毒载体.方法:PCR扩增含有CARP全长cDNA的片段,经测序验证无误后,亚克隆至pAdTrack-CMV穿梭质粒,再与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5 183中进行同源重组产生腺病毒载体质粒.经过抗性筛选以及酶切鉴定得到阳性的重组质粒,再在293细胞中进行包装扩增,利用Adeasy系统上的绿色荧光蛋白标签鉴定病毒表达.结果:测序证实PCR产物为CARP全长cDNA;抗性筛选及酶切鉴定均表明重组腺病毒载体构建成功;转染293细胞3天后可见

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