【摘 要】
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目的研究华蟾素(cinobufagin)对人早幼粒白血病细胞株NB4的诱导凋亡作用,并探讨可能的分子机制。方法通过细胞计数观察华蟾素对细胞的生长抑制作用,荧光染色观察细胞凋亡的形
【机 构】
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上海第二医科大学附属瑞金医院血液科
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目的研究华蟾素(cinobufagin)对人早幼粒白血病细胞株NB4的诱导凋亡作用,并探讨可能的分子机制。方法通过细胞计数观察华蟾素对细胞的生长抑制作用,荧光染色观察细胞凋亡的形态学改变,DNA凝胶电泳观察DNA的片段化改变,流式细胞术定量分析细胞凋亡。免疫荧光结合流式细胞术检测bcl-2表达、半定量RT-PCR检测Fas和FasL的表达。结果与对照组相比,1:100~1:25浓度的华蟾素能明显抑制NB4细胞生长。经华蟾素作用后,NB4细胞出现凋亡典型的形态学改变,核浓聚、核碎裂、凋亡小体形成;DNA电泳出现凋亡特有的“梯子”条带;流式细胞术也证实凋亡的存在。在经1:100、1:50、1:25浓度的华蟾素作用2d后,细胞凋亡率分别为12.49%、18.53%、37.76%。凋亡细胞的bd-2的表达下调,Fas表达上调,FasL表达无变化。结论华蟾素能抑制NB4生长并诱导凋亡,可能是通过下调bcl-2的表达,增加Fas的表达来实现。
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