真核双顺反子表达载体pcDNA3.1AB的构建与表达

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sunningyou

【摘要】

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为了构建由双CMV启动子调控的真核双顺反子表达载体pcDNA3.1AB,首先在pcDNA3.1（＋）的基础上,构建出pcDNA3.1A和pcDNA3.1B,然后通过PCR方法扩增pcDNA3.1A上含PCMV-MCS-BGHpolyA表

【作者】

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曹三杰邓飞杨恒黄小波文心田

【机构】

：

四川农业大学动物学院动物传染病与基因芯片实验室

【出处】

：

农业生物技术学报

【发表日期】

：

2008年6期

【关键词】

：

双顺反子载体构建红色荧光蛋白绿色荧光蛋白 bicistronic vector construction red fluorescent protein

【基金项目】

：

教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目（No.IRT0555-9）资助.

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为了构建由双CMV启动子调控的真核双顺反子表达载体pcDNA3.1AB,首先在pcDNA3.1（＋）的基础上,构建出pcDNA3.1A和pcDNA3.1B,然后通过PCR方法扩增pcDNA3.1A上含PCMV-MCS-BGHpolyA表达单元的片段,再定向克隆入pcDNA3.1B,最后得到载体pcDNA3.1AB。将DsRed与EGFP基因插入pcDNA3.1AB,分别构建pcDNA-DsRed、pcD-NA-EGFP和pcDNA-DsRed-EGFP真核表达质粒,并转染COS-7细胞瞬时表达。用荧光显微

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