枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：caocao0121

【摘要】

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目的：研制高效分泌表达枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的毕赤酵母基因工程菌株。方法与结果：将优化设计的枯草芽孢杆菌MA139β-甘露聚糖酶基因用EcoR I／Xba I双酶切，克隆到诱导型表达

【作者】

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马威沈志娜陈轶群李志民曹云鹤

【机构】

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中国农业大学动物营养学国家重点实验室,哈尔滨师范大学生命科学院

【出处】

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生物技术通讯

【发表日期】

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2010年2期

【关键词】

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Β-甘露聚糖酶枯草芽孢杆菌毕赤酵母分泌表达 β-mannanase Bacillus subtilis Pichia pastoris secreting

【基金项目】

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国家高技术研究发展计划（2007AA200601）,教育部新世纪优秀人才支持计划（NCET-07-0807）,动物营养学国家重点实验室自主研究课题（2004DA225184（团）0806）

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目的：研制高效分泌表达枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的毕赤酵母基因工程菌株。方法与结果：将优化设计的枯草芽孢杆菌MA139β-甘露聚糖酶基因用EcoR I／Xba I双酶切，克隆到诱导型表达载体pPICzoLA中α因子信号肽编码序列的下游，转化大肠杆菌筛选重组质粒，转化毕赤酵母X-33感受态细胞，经Zeocin筛选，获得重组表达菌株X-33／mann。将重组菌株在10L全自动发酵罐中进行高密度发酵培养，甲醇诱导72h发酵活力达到2100U／mL。重组甘露聚糖酶的最适催化温度为40℃，最适催化pH值为6．0。结

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