猪细小病毒NS1基因的原核表达及重组蛋白的复性

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：skyskysky094411

【摘要】

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利用PCR技术扩增出PPVNS1基因抗原区。将目的基因与原核表达载体pGEX-4T-1进行连接并转化，重组质粒经鉴定并测序。测序结果表明，目的基因插入的位置、大小和读码框均正确，通过试

【作者】

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金喜新崔保安魏战勇刘占通王学斌田永军

【机构】

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河南农业大学河南省动物食品安全重点实验室,河南省畜牧局郑州,不详

【出处】

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微生物学报

【发表日期】

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2007年1期

【关键词】

：

猪细小病毒 NS1基因原核表达变性复性 PPV Gene NS1 Prokaryotice expression Denaturation Rena

【基金项目】

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国家“十五”食品安全重大攻关专项（2001BA804A30-11）

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利用PCR技术扩增出PPVNS1基因抗原区。将目的基因与原核表达载体pGEX-4T-1进行连接并转化，重组质粒经鉴定并测序。测序结果表明，目的基因插入的位置、大小和读码框均正确，通过试验摸索并确定了表达NS1基因的最佳诱导条件：IPTG终浓度为1．0mmol／L，诱导时间为10h，温度为37℃，其表达量占全菌蛋白的29．8％。表达产物经SDS-PAGE分析，得到分子量约为52kDa的重组蛋白且以包涵体形式存在。重组蛋白经Westem blot检测，结果证明重组蛋白可被PPV阳性血清识别。用8mol／L尿素

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