促凋亡因子Smac/DIABLO与核受体NR4A1相互作用的筛选和鉴定

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:manhong85
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目的利用酵母双杂交技术筛选线粒体促凋亡因子野生型Smac/DIABLO的相互作用蛋白。方法①设计促凋亡因子野生型Smac/DIABLO引物,利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增野生型Smac/DIABLO基因片段,构建酵母真核表达载体pDBLeu—Smac/DIABLO。②pDBLeu—Smac/DIABLO诱饵质粒转化酵母MAY203,Westernblot检测融合蛋白在酵母中的正确表达,自激活作用的检测并确定抑制His基础表达的3AT浓度。③对成人肝eDNA文库的筛选。选择能同时激活His、Ura、L
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