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目的构建能在体外大量表达可溶性天然型增强绿色荧光蛋白（EGFP）的pET28a—EGFP原核表达载体。方法以质粒pEGFP—N1为模板扩增EGFP基因，EcoRI和HindⅢ双酶切EGFP基因序列和pET28a载体。T4DNA连接酶连接，转化大肠埃希菌DH50t，提取载体，酶切和DNA测序鉴定。将pET28a—EGFP转化大肠埃希菌BL21（DE3），异丙基-B—D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，观察荧光。体外翻译系统中加入重组pET28a—EGFP载体，孵育后观察荧光。免疫印迹法（Western blo