计算机辅助设计提高人NMDA受体主亚基M3-M4环在E-coli中的表达

来源 :基础医学与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户：erpangpang

【摘要】

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基于对螺旋区随机堆积的RNA二级结构的预测和密码子偏性计算, 建立了pBV220载体中外源基因高效表达的判别模型.该模型认为,外源基因的表达水平与其5′端-30～39区域,以及3′端3

【作者】

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张玉梅孙长凯范明李伍举赵杰韩大跃王吉庆吴加金

【机构】

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大连医科大学,大连医科大学,军事医学科学院,解放军大连210医院

【出处】

：

基础医学与临床

【发表日期】

：

2003年5期

【关键词】

：

计算机辅助设计人NMDA受体 E-coli 基因克隆主亚基 M3-M4环 N-甲基-D-门冬氨酸受体 human NMDA receptor RNA se

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基于对螺旋区随机堆积的RNA二级结构的预测和密码子偏性计算, 建立了pBV220载体中外源基因高效表达的判别模型.该模型认为,外源基因的表达水平与其5′端-30～39区域,以及3′端30～-39区域的RNA二级结构自由能具有显著的统计学意义;其次与3′端9 bp的局部密码子偏性相关.据此模型,使用RNAfold和Goldkey软件优化改构设计了用于克隆表达人NMDA受体主亚基M3-M4环的引物.将PCR扩增的基因克隆入pBV220载体中,在大肠杆菌DH5α宿主中获得了高效表达(表达水平在20%以上).

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