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目的:建立同时快速、准确、定量检测阿胶制品中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌活菌的方法.方法:查找沙门氏菌和金黄色葡萄球菌特异性的基因设计引物和探针,结合PMA预处理探究活菌检测效果,优化反应条件和评价检测性能.结果:建立了PMA-mqPCR定量检测沙门氏菌和金黄色葡萄球菌活菌的方法,纯培养液中沙门氏菌的检测灵敏度为102 CFU·mL-1,金黄色葡萄球菌的检测灵敏度为101 CFU·mL-1,阿胶制品加标样的检测灵敏度均为103 CFU·mL-1.该方法能够有效区分活菌中的死菌,活菌回收率在95.7％～105.6％.结论:建立了一种高效、灵敏的检测方法,能够极大地缩短检测时间和提高检测效率,且能够用于阿胶制品中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌活菌定量检测.