【摘 要】
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利用PCR技术扩增编码钩虫中性白细胞抑制因子(NIF)成熟肽的cDNA,克隆于表达载体pET-21a(+),序列分析表明与文献报道一致.经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)plys中实现高效可溶
【机 构】
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重庆大学,重庆富进生物医药有限公司
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利用PCR技术扩增编码钩虫中性白细胞抑制因子(NIF)成熟肽的cDNA,克隆于表达载体pET-21a(+),序列分析表明与文献报道一致.经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)plys中实现高效可溶性表达.SDS-PAGE分析结果表明,外源蛋白(相对分子质量28 900)约占全菌蛋白的20%.菌体用溶菌酶处理,上清经Q-Sepharose FF阴离子交换、羟基磷灰石层析、Sephacryl S-100凝胶过滤,得到纯度约95%的重组NIF.活性测定结果表明,大肠杆菌表达的重组NIF能有效地抑制中性白细
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