八棱海棠MdPPO2B基因的表达及功能分析

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多酚氧化酶(PPO)是一种含多个铜离子的氧化还原酶,可催化酚类物质氧化为醒类物质。我们从八棱海棠中克隆到一个PPO的同源基因MdPPO2B,构建该基因酵母分泌表达载体并转化到毕赤酵母GS115中。SDS-PAGE电泳结果显示,表达蛋白MdPP02B的分子量约为66.4 kDa。以邻苯二酚作为底物,该酶的最适pH和温度分别为6.5和40℃。除Cu2+、Na+、Mg2+和Li+外,4 mmol·L-1的Fe3+,Zn2+,Mn2+对酶活力表现出较强的抑制作用。在最适条件下,当苯酚浓度达600μmol·L-1时,反应4h,MdPPO2B表达菌株可降解80%的苯酚。表明该基因在工业污水处理中具有广阔的应用潜力。
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