微小RNA-877对胃癌细胞增殖及侵袭的影响

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目的

观察微小RNA(miRNA,miR)-877对SGC7901胃癌细胞增殖及侵袭的影响。

方法

采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-877在胃癌细胞株(SGC7901、MGC803、MKN-45、BSG823、HGC-27、AGS)及正常人胃黏膜上皮细胞株(GES-1)中的相对表达量。合成miR-877激动剂(miR-877 mimics),应用Lipofectamine™ 2000将miR-877 mimics及阴性对照转染SGC7901胃癌细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,蛋白质印迹法(Western blot)检测磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(PKB,又称Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达。应用GraphPad Prism 7.0统计软件分析,两样本均数间的比较采用Student t检验。

结果

miR-877在胃癌细胞株SGC7901(0.21±0.05),MGC803(0.63±0.11),MKN-45(0.35±0.07),BSG823(0.49±0.08),HGC-27(0.75±0.10),AGS(0.43±0.07)中的相对表达量明显低于GES-1(1.09±0.13)细胞(P均<0.05)。MiR-877 mimics组(0.27±0.05)细胞中miR-877的相对表达量低于阴性对照组(1.06±0.11,t=11.690,P<0.01)。CCK-8实验结果显示,72 h后miR-877 mimics组吸光度值(1.59±0.09)低于阴性对照组(2.28±0.11,t=4.746,P<0.01)。Transwell实验结果显示,miR-877 mimics组(43.60±17.30)细胞侵袭数量显著低于阴性对照组(129.35±16.70,t=8.148,P<0.01)。Western blot结果显示miR-877 mimics组细胞中PI3K、Akt、p-Akt的表达量低于阴性对照组(P均<0.01)。

结论

miR-877可抑制胃癌细胞增殖与侵袭,这一作用与抑制PI3K/Akt信号通路有关。

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