【摘 要】
：
目的 观察人端粒酶逆转录酶(hTERT)对胶质瘤U87细胞增殖及凋亡的影响.方法 构建靶向hTERT的小干扰RNA(siRNA)表达质粒转染U87细胞,通过Western blot检测hTERT蛋白的表达水平,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测hTERT mRNA表达水平,采用噻唑蓝(MTT)法及流式细胞仪分别检测转染后U87细胞的增殖活性及凋亡率.结果 与空白对照组及阴性对照组比较,各
【机 构】
：
430060武汉大学人民医院神经外科,430060武汉大学人民医院神经外科
论文部分内容阅读
目的 观察人端粒酶逆转录酶(hTERT)对胶质瘤U87细胞增殖及凋亡的影响.方法 构建靶向hTERT的小干扰RNA(siRNA)表达质粒转染U87细胞,通过Western blot检测hTERT蛋白的表达水平,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测hTERT mRNA表达水平,采用噻唑蓝(MTT)法及流式细胞仪分别检测转染后U87细胞的增殖活性及凋亡率.结果 与空白对照组及阴性对照组比较,各siRNA-hTERT干扰组hTERT蛋白表达水平明显降低;各siRNA-hTERT干扰组hTERT mRNA相对表达量分别为0.79 ±0.11、0.58±0.15、0.39±0.16,与阴性对照组比较明显降低,其差异有统计学意义(P＜0.05);与空白对照组及阴性对照组比较,转染siRNA-hTERT后U87细胞的增殖受到明显抑制且在第3天时最明显;转染48 h后各siRNA-hTERT干扰组U87细胞凋亡率分别为(14.31±0.93)％、(17.57±0.61)％、(22.68±1.04)％,与空白对照组及阴性对照组比较明显增加,其差异有统计学意义(P＜0.05).结论 靶向hTERT基因的siRNA转染U87细胞后可以显著抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡的发生。
其他文献
目的 观察博莱霉素涂层支架对兔胆管良性狭窄的影响.方法 24只新西兰白兔行胆管损伤后平均分入A、B组,分别将博莱霉素涂层支架和普通支架植入两组兔的肝外胆管内.0d、4周后,取耳缘静脉血,检测总胆红素变化,随后处死兔,取植入支架行石蜡切片,行苏木素-伊红(HE)染色,并采用计算机图像检测系统检测两组胆管腔面积变化,同时各组切片行Fas、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SM
目的 基因敲入技术建立成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)功能持续增强小鼠模型(FGFR2S252W/+),观察p38信号通路在FGFR2功能持续增强对软骨内成骨过程的影响.方法 获取出生后6周小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行体外培养并进行成软骨诱导.Western blot检测pβ8信号蛋白,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)比较野生型及突变型Ⅱ型胶原(Col2)、X型胶原(Col10
目的 观察肺特异性X蛋白(LUNX)在PN0期非小细胞肺癌(NSCLC)原发病灶和转移淋巴结中的表达,探讨LUNX在PN0期NSCLC淋巴结微转移中的作用.方法 收集我院经手术切除且病理检查证实的52例PN0期NSCLC病例,记录各患者性别、年龄、吸烟史、肿瘤性质、浸润程度、淋巴结微转移及TNM分期等临床各项资料.将切除的肿瘤标本和清扫的淋巴结标本,行免疫组织化学染色,并提取肿瘤和淋巴结组织的DN
目的 探讨免辅助装置手助腹腔镜巨脾切除的可行性、技术优势以及术中同步脾血回输的临床价值.方法 分析自2007年10月至2011年10月间行巨脾切除的肝硬化门脉高压症48例患者的临床资料,按手术方式分免辅助装置的手助腹腔镜组(n=30)、完全腹腔镜组(n=12),另6例为中转手助或开腹手术.比较术中出血、手术时间与取脾时间;按脾脏长径(＞ 20 em或≤20 cm)分为重度脾肿大(n=28)与中度脾
目的 观察天然基质金属蛋白酶(MMPs)在大鼠脑动脉瘤模型的作用.方法 健康成年雄性大鼠32只,随机分为高血压组和MMPs干预组(各16只),前者手术造成肾性高血压,后者应用天然性MMP-2、MMP-9干预,分别于术后1、3、5周采集标本,观察脑动脉瘤形成,并检测MMPs血浆浓度及其基因表达水平变化.结果 病理学观察见高血压组有5只大鼠的脑底动脉环有明显动脉瘤形成,干预组结构基本正常.缸浆MMP-
目的 观察洛铂对胆管癌RBE细胞抗肿瘤作用及B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、actived-半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8和细胞色素C(Cyt-C)转录及表达的影响.方法 不同浓度洛铂干预胆管癌RBE细胞一定时间,噻唑蓝(MTT)比色法检测RBE细胞的生长抑制,流式细胞法检测细胞周期,膜联蛋白V(Anne
目的 观察人RUNT相关转录因子3(RUNX3)和信号诱导增殖相关蛋白1(Sipa1)在胃癌组织中的表达,探讨两者与胃癌临床意义的关系.方法 采用免疫组织化学法检测62例胃癌组织及相应癌旁组织中RUNX3和Sipa1表达水平.结果 RUNX3在胃癌组织中表达率为62.90％(39/62),在癌旁组织中的表达率为93.55％ (58/62),两者比较差异有统计学意义(P＜0.01),RUNX3表达水
目的 探讨DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)在人肝癌细胞株(SMMC7721)中调节细胞周期素(Cyclin) D1基因表达的机制.方法 用DNMT3b的小干扰RNA(siRNA)表达载体转染SMMC7721细胞抑制DNMT3b的表达;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测微小RNA(miR)-145、Cyclin D1 mRNA表达的变化;用甲基化特异性PCR (MSP)技术检测miR-
目的 探讨双容积成像对颅内动脉瘤即刻栓塞效果的评价价值.方法 采用血管内治疗43例患者、共43枚颅内动脉瘤,对术后即刻的二维数字减影血管造影(2D-DSA)和双容积成像进行分析,比较两种成像技术显示动脉瘤残留的能力.术后评价结果分为完全栓塞、瘤颈残留和瘤体残留.采用Mann-Whitney Test对两种成像技术的评价结果进行比较.结果 43枚动脉瘤术后2D-DSA显示26枚完全栓塞,10枚瘤颈残
目的 双氢青蒿素治疗人胆管癌QBC939裸鼠种植瘤的作用并探讨其可能的作用机制.方法 建立人胆管癌QBC939裸鼠种植瘤动物模型,随机分3组:双氢青蒿素组(DHA)、空白对照组(生理盐水)、溶剂对照组(植物油),对比分析各组裸瘤重量、抑瘤率、缺氧诱导因子(HIF)-1α的表达、计数微血管密度(MVD)和凋亡指数(AI).结果 DHA组的种植瘤体积(1 979.63±357.29) mm3]和重量[