环境样品中DNA的分离纯化和文库构建

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sgeblis

【摘要】

：

采用研磨/冻融和SDS/蛋白酶K热处理等理化方法,直接从性质不同的环境样品中提取和纯化混合基因组DNA.所获得纯品DNA的产量为每克样品2～16ug.对纯品DNA进行限制性内切酶处理后,

【作者】

：

王啸波唐玉秋王金华黄仪秀陈润生黄力

【机构】

：

北京大学生命科学学院生物化学系,中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室,中国科学院生物物理研究所

【出处】

：

微生物学报

【发表日期】

：

2001年2期

【关键词】

：

环境样品 DNA分离纯化混合基因组DNA文库未培养微生物

【基金项目】

：

中国科学院生物科学与技术研究特别支持费资助!(STZ97 3 0 1 )&&

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采用研磨/冻融和SDS/蛋白酶K热处理等理化方法,直接从性质不同的环境样品中提取和纯化混合基因组DNA.所获得纯品DNA的产量为每克样品2～16ug.对纯品DNA进行限制性内切酶处理后,构建了以pUC18为载体的DNA文库.建库效率为从每克环境样品获得约103～104个含3～8kb外源随机插入片段的克隆.通过DNA序列测定和基因注释,对从文库中随机选取的克隆进行了分析,发现外源插入片段均含序列未见报道的新基因.本文所做的尝试对于保存、研究和开发未培养微生物基因资源具有意义.

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