表达miR-150shRNA细胞株的初步建立

来源 :动物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sunhoe

【摘要】

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为了探讨融合microRNA重组干扰载体构建的方法，为今后miR-150对猪瘟病毒（CSFV）潜在的调控进行研究，利用生物信息学技术筛选出miR-150，设计并合成了表达miR-150的两条shRNA序列的DN

【作者】

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代晨邓文张彦明

【机构】

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西北农林科技大学动物医学院

【出处】

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动物医学进展

【发表日期】

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2009年8期

【关键词】

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猪瘟病毒 miR-150 发夹RNA 转染 CSFV miR-150 short hairpin RNA transfection

【基金项目】

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国家自然科学基金项目（30771607）,家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金项目（猪瘟病毒感染相关microRNA的克隆与鉴定）

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为了探讨融合microRNA重组干扰载体构建的方法，为今后miR-150对猪瘟病毒（CSFV）潜在的调控进行研究，利用生物信息学技术筛选出miR-150，设计并合成了表达miR-150的两条shRNA序列的DNA单链，将其退火后与干扰载体pGenesil-1连接，构建了含有miR-150shRNA和绿色荧光蛋白基因的重组干扰质粒pGene—miR-150shRNA，提取并纯化质粒后，采用脂质体法将重组质粒转染PK-15细胞，用G418抗性筛选。经过酶切鉴定和测序鉴定，表明成功构建了重组干扰质粒pGene—

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