论文部分内容阅读
目的
探讨β肾上腺素受体（β-AR）激活对人肾小球系膜细胞（HMC）凋亡的影响及其机制。
方法HMC被分为空白对照（Ctrl）组；β-AR激活（NE/Pra）组；β-AR抑制（Prop）组；抗氧化剂（VC和NAC）组。采用反转录PCR法检测系膜细胞β肾上腺素受体的表达；激光共聚焦术测定细胞内钙信号变化；Tunel法检测细胞凋亡；Western印迹法检测细胞内半胱天冬酶3 （Caspase-3）的表达。
结果反转录PCR结果显示，人系膜细胞有β1-AR和β2-AR mRNA表达；激光共聚焦结果显示，β1-AR和β2-AR激动剂均能诱导系膜细胞内钙信号变化（P<0.05）；β-AR激活组诱导人系膜细胞产生活性氧类（ROS）增加，β-AR激动剂作用后ROS从0.5 h开始增多，4 h达到高峰，之后减弱，但在12 h时，细胞内ROS仍然超过对照组（P< 0.01）。并且随着β-AR激动剂浓度增加，ROS生成增加。与对照组相比，β-AR激活组诱导人系膜细胞凋亡率增加，并随β-AR激动剂浓度增加和作用时间延长，凋亡细胞数随之增加（均P <0.01）。抗氧化剂维生素C和NAC可减轻由β-AR激活诱导的细胞凋亡（P<0.01），β-AR阻断剂普萘洛尔可减轻细胞内ROS产生和β-AR激活诱导的细胞凋亡。与对照组相比，β-AR激活可诱导系膜细胞Caspase-3表达上调（均P<0.01）。
结论β-AR激活可诱导人系膜细胞凋亡，其机制可能是与β-AR激活增加细胞内氧化应激水平有关。