探讨抑制miR-218的表达对人去势抵抗型前列腺癌C4-2细胞增殖、侵袭及迁移的影响及其机制。
方法培养人去势抵抗型前列腺癌C4-2细胞，分为空白组、阴性对照组(NC组)、miR-218组；空白组未予以任何处理，NC组转染阴性对照序列，miR-218组转染miR-218抑制剂。各组细胞处理后继续培养5 d，然后收集细胞，采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测转染后各组细胞miR-218的表达情况，采用WST-1细胞增殖实验和细胞平板克隆形成实验检测转染后各组C4-2细胞增殖、活性情况，采用划痕实验检测各组C4-2细胞迁移距离，采用Transwell小室检测细胞侵袭数量和迁移数量，采用半定量逆转录PCR(RT-PCR)检测TOB1基因mRNA表达情况，采用Western blot检测TOB1基因蛋白表达情况。
结果qPCR结果显示：转染后NC组、miR-218组人去势抵抗型前列腺癌C4-2细胞miR-218的相对表达量分别为1.02±0.06、0.38±0.04，miR-218组中miR-218的表达明显低于NC组，差异有统计学意义(t＝15.372，P<0.05)。WST-1细胞增殖实验结果显示：(1)转染后空白组、NC组随着时间的延长，光密度(OD)值呈上升趋势，而miR-218组OD值在24、48 h时呈上升趋势，72 h时OD值开始明显下降；(2)空白组、NC组、miR-218组组间比较，OD值在0、24 h时3组间差异均无统计学意义(P值均>0.05)，48、72 h时miR-218组OD值均小于空白组、NC组，差异均有统计学意义(F＝12.615、24.523，P值均<0.05)。细胞平板克隆形成实验结果显示：转染后空白组、NC组和miR-218组克隆形成数分别为(42.2±1.2)个、(41.3±2.4)个、(20.6±1.2)个，miR-218组明显少于空白组、NC组，差异均有统计学意义(F＝155.530，P<0.05)。划痕实验和Transwell小室细胞侵袭、迁移实验结果显示：转染后，miR-218组细胞迁移距离、侵袭细胞数和迁移细胞数均低于空白组和NC组，差异均有统计学意义(F＝17.625、48.625、38.352，P值均<0.05)；而空白组和NC组间细胞迁移距离、侵袭细胞数和迁移细胞数比较，差异均无明显统计学意义(P值均>0.05)。RT-PCR和Western blot检测结果显示：转染后空白组、NC组、miR-218组TOB1基因mRNA的相对表达量分别为0.20±0.02、0.19±0.03、0.35±0.02，TOB1基因蛋白的相对表达量分别为0.22±0.01、0.23±0.02、0.68±0.02，miR-218组细胞中TOB1 mRNA和蛋白水平均明显高于空白组和NC组，差异均有统计学意义(F＝18.615、22.523，P值<0.05)；而空白组细胞中TOB1 mRNA和蛋白水平与NC组比较，差异均无统计学意义(P值>0.05)。
结论抑制人去势抵抗型前列腺癌C4-2细胞miR-218的表达，可抑制该细胞的增殖和活性，并抑制其侵袭和迁移能力，其机制可能与上调TOB1基因mRNA和蛋白表达有关。