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通过升高色谱柱温度，结合线性梯度洗脱的分离模式调整色谱分离的选择性，提出了一种测定脑蛋白水解物注射液中氨基酸含量的2，4-二硝基氟苯（DNFB）柱前衍生高效液相色谱方法。本法采用Kromasil C18（250×4．6mmi．d．，5μm）色谱柱，柱温44℃，在30min内以3个线性梯度能完全分离17种氨基酸，定量线性范围为0．2～1．0mg／L；加标回收率为89％～108％。该法具有适用性好、稳定性高等特点，也可以应用于其它种类样品中氨基酸的测定。