【摘 要】
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目的 获得HIV-1型gag基因p17+24重组抗原,分析其免疫原性和探讨开发诊断试剂的可能性.方法 采用PCR技术扩增HIV-1 gag基因p17+p24核酸片段,并克隆入pTrcHis2A表达质粒,在大肠
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目的 获得HIV-1型gag基因p17+24重组抗原,分析其免疫原性和探讨开发诊断试剂的可能性.方法 采用PCR技术扩增HIV-1 gag基因p17+p24核酸片段,并克隆入pTrcHis2A表达质粒,在大肠杆菌BL21(DK3)株中表达.用Ni-NTA金属螯合层析法纯化目的蛋白,并用免疫印迹法分析纯化蛋白的抗原特异性.结果 重组质粒在BL21(DE3)菌株中经IPTG诱导表达一个相对分子质量(Mr)约为51×103的融合重组蛋白,重组蛋白经HIV-1 p17、p24抗原单克隆抗体鉴定,具有抗原特异性.25份HIV阳性血清、180份HIV阴性血清标本初步经临床验证,具有较高的检出敏感性和特异性.结论 成功构建HIV-1型gag基因p17+24抗原表达载体,表达纯化的p17+24重组抗原具有较好的抗原性,可用于诊断试剂的开发.
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