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目的:本实验拟构建hVEGF165基因的真核表达载体,为其应用于治疗大鼠缺血皮瓣的研究奠定基础。方法:设计引物P1和P2,在每一个引物的两端分别添加BamHI、XhoI酶切位点。从人外周血中提取总RNA,用RT—PCR方法得到hVEGF165的cDNA。随后再将得到的cDNA连人中间载体pMD19-T,得到pMD19-T—hVEGF165,双酶切鉴定并测定序列。将hVEGF165的cDNA亚克隆到真核表达载体pcDNA6/HisA中,构建hVEGF165真核表达载体pcDNA6-hVEGF165。结果:对