探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)对脂多糖刺激巨噬细胞引发炎症反应的影响及其调节机制。
方法通过小鼠的股骨分离骨髓干细胞，经过分化培养获得骨髓来源的巨噬细胞，再通过脂多糖刺激巨噬细胞诱导细胞炎症因子表达的细胞模型。利用PPARα选择性激动剂Wy14643干预炎症细胞模型，3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine，3-MA)和Atg7小干扰RNA(Atg7 siRNA)分别作为自噬抑制剂干预自噬。通过实时定量PCR方法检测炎症细胞因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、IL-6和自噬相关基因Atg5、Atg7、Beclin-1的mRNA表达水平；通过免疫印迹技术检测自噬相关蛋白Atg5、Atg7、Beclin-1和LC3的表达；质粒GFP-LC3转染并观察自噬点的形成。
结果研究表明，不同浓度的PPARα选择性激动剂Wy14643(10 μmol/L、25 μmol/L和50 μmol/L)预处理LPS刺激的巨噬细胞，与单独LPS刺激巨噬细胞相比，细胞炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达下降，并具有剂量依赖性。此外，不同浓度Wy14643作用于巨噬细胞，也同时促进自噬相关蛋白Atg5、Atg7、Beclin-1的mRNA水平表达升高；Western blot结果显示自噬相关蛋白Atg5、Atg7、Beclin-1和LC3表达增加；荧光显微镜观察显示巨噬细胞中自噬点的形成增加。在Wy14643预处理的基础上，3-MA和Atg7 siRNA分别抑制细胞自噬，结果显示炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达水平发生了逆转，重新表达升高。
结论PPARα激活可抑制LPS刺激巨噬细胞诱导的促炎细胞因子的表达，并且PPARα通过促进细胞自噬而发挥抗炎作用。因此，PPARα-自噬分子途径是调控LPS诱导的巨噬细胞炎症反应的信号通路之一。