【摘 要】
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目的 探讨栀子苷对缺氧心肌微血管内皮细胞的影响及其分子机制.方法 建立心肌细胞缺氧(Hypoxia)组,缺氧条件为37℃、95％N2+5％CO2处理48 h,不做任何处理的细胞作为对照(Control)
【机 构】
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山西省人民医院心血管外科,太原 030012
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目的 探讨栀子苷对缺氧心肌微血管内皮细胞的影响及其分子机制.方法 建立心肌细胞缺氧(Hypoxia)组,缺氧条件为37℃、95％N2+5％CO2处理48 h,不做任何处理的细胞作为对照(Control)组;用终浓度为12.5、25、50μg/ml的栀子苷处理CMECs细胞12 h后再进行缺氧处理,作为不同浓度栀子苷处理组;将miR-con和miR-335组质粒分别转染至CMECs细胞中,然后用终浓度为50μg/ml的栀子苷处理12 h后再进行缺氧处理48 h,分别记为Hypoxia+Geniposide 50μg/ml+miR-con组、Hypoxia+Geniposide 50μg/ml+miR-335组,转染均采用脂质体法.qRT-PCR检测细胞中miR-335的表达水平;免疫印迹检测蛋白表达水平;MTT法检测细胞增殖活力;Transwell检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞凋亡.结果 缺氧处理的心肌微血管内皮细胞增殖活力显著降低,miR-335的表达水平显著升高,细胞迁移数量降低,凋亡率升高;而栀子苷可以抑制miR-335的表达,抑制缺氧心肌微血管内皮细胞增殖活力、凋亡和促进细胞迁移.过表达miR-335能部分逆转栀子苷对缺氧处理心肌微血管内皮细胞增殖活力、凋亡的抑制和迁移促进作用.结论 栀子苷保护缺氧诱导的心肌微血管内皮细胞凋亡,其机制可能与下调miR-335相关.
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