SRSF9基因敲除胶质母细胞瘤细胞株基因回补及其功能研究

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mmmzyh

【摘要】

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目的在CRISPR/Cas9敲除SRSF9基因的胶质母细胞瘤U87单克隆株中进行SRSF9基因回补并进行回补功能研究。方法构建SRSF9-WT过表达载体并同义突变sgRNA1靶序列上的5个碱基构建SRS

【作者】

：

汪京京张真豪穆会君龚玲丽邹健殷莹

【机构】

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南京医科大学附属无锡人民医院临床研究中心

【出处】

：

安徽医科大学学报

【发表日期】

：

2021年4期

【关键词】

：

CRISPR/Cas9 同义突变基因回补 SRSF9 神经胶质瘤 CRISPR/Cas9 synonymous mutation gene rescue SR

【基金项目】

：

国家自然科学基金(编号:81572468),国家自然科学青年基金(编号:81802493),江苏省青年医学重点人才培养项目(编号:QNRC2016188)

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目的在CRISPR/Cas9敲除SRSF9基因的胶质母细胞瘤U87单克隆株中进行SRSF9基因回补并进行回补功能研究。方法构建SRSF9-WT过表达载体并同义突变sgRNA1靶序列上的5个碱基构建SRSF9-sgMu过表达载体并包装成慢病毒,感染U87 SRSF9基因敲除单克隆细胞,构建SRSF9基因回补细胞株。利用Western blot和免疫荧光实验验证回补蛋白的定位,利用增殖和肿瘤干细胞成球实验验证回补基因的拯救功能。结果成功构建SRSF9-WT和SRSF9-sgMu过表达载体并包装成慢病毒。Wes

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