【摘 要】
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目的 探讨甲状旁腺激素(PTH)对人近曲小管上皮细胞系HK-2细胞分泌结缔组织生长因子(CTGF)及细胞转分化的影响.方法 应用实时定量PCR和Western印迹观察PTH诱导HK-2细胞CTGF mR
【机 构】
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济南军区总医院肾内科,上海交通大学附属上海市第一人民医院肾内科,第二军医大学附属长海医院肾内科
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目的 探讨甲状旁腺激素(PTH)对人近曲小管上皮细胞系HK-2细胞分泌结缔组织生长因子(CTGF)及细胞转分化的影响.方法 应用实时定量PCR和Western印迹观察PTH诱导HK-2细胞CTGF mRNA和蛋白表达情况,从转录水平探讨PTH对CTGF基因启动子活性的调控作用.应用免疫荧光技术检测PTH作用下HK-2细胞中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 HK-2细胞有基础水平的CTGF mRNA和蛋白表达,PTH刺激后其表达量显著增加.FTH最佳刺激浓度是10-10 mol/L,最佳刺激时间是72 h.10-10 mol/L PTH干预HK-2细胞12 h后,荧光素酶活性较对照组显著升高(1 .888±0 .078比0 .989±0 .030,P＜O .01);光镜下可见细胞由立方形铺路石样转变为梭形,随作用时间延长转分化现象更显著.PIM刺激HK-2细胞12 h后,免疫荧光检测可见细胞质中有α-SMA表达;PTH刺激24 h后,α-SMA表达明显增多,与CTGF mRNA和蛋白表达的时间效应一致.结论 PTH可上调HK-2细胞CTGF表达,并具有促进HK-2细胞转分化的作用.
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