【摘 要】
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目的:获得稳定性、重复性好的RAPD-PCR反应体系,并构建血满草DNA指纹图谱和进行遗传多样性分析。方法:以血满草3个居群11个个体的幼叶为材料,CTAB法提取基因组DNA,从模板浓度
【机 构】
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云南民族大学民族药资源化学国家民委-教育部重点实验室; 云南农业大学基础与信息工程学院; 中国科学院昆明植物研究所;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(“壳斗科栎属川滇高山栎分子谱系地理学研究”,No.31060031);云南民族大学民族药资源化学国家民委-教育部共建重点实验室开放基金项目(“罗平布依族药用植物资源的民族植物学调查”,No.MZY1301)资助
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目的:获得稳定性、重复性好的RAPD-PCR反应体系,并构建血满草DNA指纹图谱和进行遗传多样性分析。方法:以血满草3个居群11个个体的幼叶为材料,CTAB法提取基因组DNA,从模板浓度、引物浓度、d NTPs浓度和Taq DNA聚合酶的用量,构建最佳的RAPD-PCR反应体系,通过扩增带型的差异构建其DNA指纹图谱,利用Popgen32、NTSYS2进行遗传多样性分析。结果:3个RAPD引物扩增血满草3个居群11个样品共获得27条可靠、清晰和重复性高的条带,其中17条是多态条带。引物SBSA5和SBSA11扩增条带组合可以构建11个样品的个体特异DNA指纹图谱。供试血满草居群间遗传距离在0.1493~0.2312之间;居群内的遗传多样性分别为0.1102、0.0153、0.2294。遗传距离和相似性聚类分析表明,样品间的遗传距离与居群的地理分布关系不明显。结论:RAPD分子标记在构建血满草DNA指纹图谱是可行的,由其构建的指纹图谱可以将供试个体相互区分鉴别出来。无论是居群间还是居群内,供试血满草的遗传多样性均较低,居群间的遗传分化较小,可能还在属于同一个大的居群。
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