恶性疟原虫乳酸脱氢酶基因克隆、可溶性表达及突变体活性分析

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:q412202242
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为了建立以代谢酶类为靶点的新型抑制剂乃至抗疟药高通量筛选和体外评价平台,从恶性疟原虫海南株FCC1中扩增出乳酸脱氢酶基因(PJLDH)。利用融合表达载体pGEX.2TK和pET-29a(+)将eft.on基因导入大肠杆菌BL21和BL21(DE3)中高效表达,结果成功地在菌体裂解上清液中检测到高酶促活性的PiLDH。以pGEX.2TK为载体的PfLDH基因主要以包涵体形式表达,以pET-29a(+)为载体的PfLDH基因则能大量表达可溶性PtLDH,表明后者更适合用来大量制备重组PfLDH。同时,根据SD
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