高核苷酸酵母水解物对LPS诱导RAW264.7细胞免疫调节的影响

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为探讨高核苷酸酵母水解物对RAW264.7小鼠巨噬细胞免疫活性调节及其相关作用机制,采用脂多糖(1μg/mL)刺激RAW264.7细胞来建立体外细胞炎症模型,以不同浓度的高核苷酸酵母水解物干预,来明确其抗炎效果。采用MTT法检测细胞增殖,Griess Reagent法检测细胞培养液中一氧化氮(NO)含量,中性红吞噬实验检测巨噬细胞的吞噬功能,ELISA检测细胞培养上清中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测巨噬细胞诱导型一氧化氮合成酶(i NOS)、IL-1β、TNF-α和IL-6mRNA水平,Westernblot法检测细胞iNOS及胞核内核转录因子NF-κBp65蛋白水平。结果表明:高核苷酸酵母水解物作用RAW264.7细胞的安全范围≤150μg/mL。与LPS模型组相比,60~150μg/mL的高核苷酸酵母水解物能显著增强RAW264.7吞噬能力,高核苷酸酵母水解物(60~150μg/mL)能有效抑制LPS诱导RAW264.7细胞释放NO、TNF-α、IL-1β和IL-6炎症因子及相关mRNA表达,降低iNOS及NF-κB蛋白水平。研究结果证实了高核苷酸酵母水解物对LPS刺激RAW264.7细胞炎症的保护作用,作用机制与NF-κB通路有关,为食疗干预慢性病提供一定的理论依据。
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