麦芽凝聚素层析柱纯化的肺癌相关抗原

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目的纯化并分析肺癌相关抗原的有关特性。方法采用商品化麦芽凝聚素Wheatgerm Lectin—Sepharose—6MB层析柱和自制抗人肺痛单克隆抗体N—35—Sepharose—4B层析柱纯化肿瘤相关抗原,比较纯化结果;用免疫印技术测定肺癌相关抗原在肺癌、肝癌、宫颈癌、乳腺痛细胞及正常人心脏及肺组织的存在及分布情况;用差速离心技术分析肺癌相关抗原在亚细胞结构的布状况;用免疫荧光技术探测肺癌相关抗原在肿瘤细跑有丝分裂过程中的染色体结构定位。结果 经麦芽凝聚素纯化的肺癌相关抗原N35以不同分子量形式存在于肺癌、肝癌、宫颈癌及乳腺癌细胞的蛋白组分中,在正常人心脏及肺组织中无表达;在亚细胞结构中主要分布于胞核,线粒体次之,胞膜上分布最少,主要不以膜蛋白或跨膜蛋白的形式存在,并定位于肿瘤细胞有丝分裂中期(methaphase)的中心粒(centriole)结构上。结论 肺癌相关抗原N35是一种重要的肿瘤相关抗原,其功能很可能与肿瘤细胞无限制增殖活动有关。麦芽凝集素亲和层析法是纯化肺癌相关蛋白N35简便有效的途径。
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